REAGENTES DE LABORATÓRIO: CLASSIFICAÇÃO, PREPARAÇÃO E FUNÇÕES - BIOLOGIA

Os reagentes de laboratório são substâncias químicas de várias naturezas e composições que ajudam o bioanalista ou clínico profissional a conduzir uma série de reações envolvidas na determinação de uma variedade de testes clínicos.

Os reagentes podem ser sólidos, líquidos ou gasosos de acordo com seu estado físico, e de acordo com sua natureza química podem ser ácidos, bases, sais, álcoois, aldeídos, entre outros. Todas as áreas de um laboratório clínico requerem o uso de vários reagentes, que diferem uns dos outros.

Laboratório de bacteriologia com uma série de reagentes. Fonte: Foto tirada pelo autor MSc. Marielsa Gil.

Os reagentes podem ser adquiridos prontos para uso; alguns devem ser reconstituídos, outros devem ser preparados a partir da mistura primária de reagentes. Eles também podem ser preparados com uma simples diluição.

A função de cada um dependerá da análise a ser realizada. Para isso, existem protocolos específicos que o analista deve seguir com atenção.

O manuseio e guarda dos reagentes de laboratório devem seguir padrões estabelecidos pela instituição, para garantir a segurança do trabalhador e sua correta conservação. Por isso, é recomendado que os reagentes sejam armazenados de acordo com a categoria de risco estabelecida pelas regulamentações governamentais.

Levar em consideração os riscos e colocar em prática as normas de biossegurança evita acidentes de trabalho.

Fonte: Elaborado pelo autor MSc. Marielsa gil

Classificação dos reagentes de acordo com o grau de perigo

Existem pelo menos 5 sistemas que classificam os reagentes de acordo com seu grau de perigo. Esses sistemas são os propostos por:

1) A Agência de Proteção Ambiental dos Estados Unidos (EPA).

2) Departamento de Segurança e Saúde Ocupacional dos Estados Unidos (OSHA, Administração de Segurança e Saúde Ocupacional).

3) A Comunidade Europeia (CE).

4) O Código IMDG (Código Marítimo Internacional de Mercadorias Perigosas).

5) As Nações Unidas (ONU).

Em geral e juntamente com o que a EPA propõe, eles podem ser classificados como altamente perigosos e perigosos.

-Reagentes altamente perigosos

São aqueles que podem causar a morte de humanos em quantidades muito baixas ou que apresentam uma dose letal em ratos igual a DL ₅₀.

-Reagentes perigosos

Eles são subclassificados como inflamáveis, corrosivos, explosivos e tóxicos.

Substâncias inflamáveis

Esta categoria inclui todos os reagentes que contêm mais de 24% de álcool em solução ou cujo ponto de fulgor está abaixo de 60 ° C.

Também incluídos nesta categoria estão todos os materiais que podem facilmente causar incêndio por fricção ou por modificações químicas espontâneas ou acúmulo de seus gases.

Da mesma forma, aqueles que são energicamente incinerados em contato com o fogo, e reagentes oxidantes como cloratos, nitratos, manganatos e peróxidos inorgânicos.

Substâncias tóxicas

Os reagentes tóxicos podem ser subdivididos em irritantes, anestésicos, asfixiantes, nefrotóxicos, hepatotóxicos, neurotóxicos e carcinógenos.

Substâncias corrosivas

Os ácidos e bases fortes se enquadram nessa categoria, ou seja, aqueles que apresentam pH abaixo de 2,1 e acima de 12,4. Essas substâncias são tão cáusticas que podem corroer o aço.

Qualquer vestígio desses reagentes pode reagir com outros resíduos e formar compostos tóxicos capazes de colocar em risco a integridade dos trabalhadores.

Esses reagentes devem ser afastados dos demais.

Substâncias reativas

São reagentes que reagem violentamente quando combinados com água, ácidos ou bases, gerando fumaça, vapores ou gases. É assim que os reagentes que contêm enxofre ou cianetos em sua composição reagem.

Substâncias explosivas

São substâncias capazes de produzir uma explosão a 25 ° C a uma pressão de 1,03 kg / cm ². Isso ocorre porque eles têm uma constante explosiva igual ou superior à do dinitrobenzeno.

Preparação de reagentes

Em geral, os reagentes devem ser preparados da seguinte forma:

Preparação do reagente a partir de solutos sólidos

De acordo com a técnica, os gramas precisos são pesados em uma balança. Os solutos sólidos são colocados em um béquer e um pouco do solvente indicado pela técnica é adicionado, geralmente é utilizada água. Se necessário, a mistura é aquecida para auxiliar na dissolução, desde que a técnica assim o indique.

Deve-se permitir que esfrie antes de ser transferido para o frasco volumétrico. Use funil para transferência. Lave o béquer com um pouco do solvente utilizado e coloque no frasco. Completar até a marca com o mesmo diluente.

Transfira para um frasco limpo e seco, rotule apropriadamente e armazene de acordo com as especificações do reagente.

Preparação de reagentes de solutos líquidos

Os mililitros correspondentes são medidos com uma pipeta sorológica ou volumétrica. Não pipete diretamente com a boca. Use propipeta. Tome cuidado para que a pipeta não se encha com bolhas.

Para isso, antes de sugar, certifique-se de que a pipeta está inserida no fundo do frasco e que continuará a fazê-lo mesmo após o término da sucção.

Colocar os mililitros medidos em um balão volumétrico, completar até a marca com o diluente. O frasco pode ser tampado e invertido várias vezes para misturar. Transfira para um recipiente limpo e seco.

Filtração de reagentes

Alguns reagentes requerem filtração, para isso são utilizados funis de papel de filtro. Um funil liso é usado se você quiser recuperar o precipitado ou um funil pregueado se o precipitado não for de interesse.

Transferência de reagente sólido

Uma espátula limpa e seca é usada para retirar pequenas quantidades de reagentes sólidos. E se a quantidade for um pouco maior, pode-se usar um papel dobrado em forma de canal para ajudar a deslizar o reagente para o outro recipiente.

Transferência de reagentes líquidos

Na transferência de líquidos altamente corrosivos, derramamentos e respingos devem ser evitados; Para isso, é utilizado um funil e colocado uma vareta de vidro por onde o líquido a ser transferido irá deslizar.

Se o reagente emitir vapores, trabalhe sob um exaustor e use o equipamento de segurança necessário (luvas, touca ou máscara, óculos de segurança, bata). Se a coifa não estiver disponível, trabalhe em um local bem ventilado.

Considerações após a preparação do reagente

Os reagentes após sua preparação devem ser acondicionados em recipientes hermeticamente fechados, de preferência na cor âmbar.

Reagentes recém preparados devem ser cuidadosamente rotulados com tinta indelével, informando o nome do reagente, data de preparação, prazo de validade e tipo de risco que apresenta (por inalação, ingestão ou contato).

A temperatura de armazenamento também é importante, o reagente preparado deve ser colocado na temperatura de armazenamento adequada. Alguns podem ser armazenados em temperatura ambiente, mas outros requerem refrigeração.

Manuseio seguro de reagentes

Os reagentes devem ser manuseados com cuidado, evitando a inalação de vapores, o contato direto com a pele ou mucosas e sua ingestão acidental. Para isso, medidas de biossegurança devem ser tomadas, como o uso de protetores bucais, máscaras, luvas, óculos de segurança e jaleco.

Todos esses elementos protegem a pessoa que manuseia os reagentes. Nem todos os reagentes emitem vapores ou são corrosivos, então você precisa aprender a conhecê-los.

Antes de manusear um reagente, verifique o rótulo do frasco e observe os pictogramas de segurança; Isso irá orientá-lo sobre as medidas preventivas a serem tomadas. Isso evitará possíveis acidentes.

Esquema de pictogramas de segurança antigos e atuais. Fonte: Lorenzo.profe

Os reagentes classificados como inflamáveis não podem ser manuseados perto de um queimador ou queimador em funcionamento.

Os rótulos dos reagentes devem ser sempre colocados no frasco, nunca na tampa. As tampas dos jarros não devem ser trocadas, nem colocadas sobre a mesa; devem ser segurados com os dedos durante o manuseio do reagente.

Não devolva o excesso de reagente retirado ao frasco original, pois pode contaminá-lo.

Se o reagente for corrosivo ou tóxico, nunca pipetar com a boca, uma propipeta deve ser sempre usada. Como medida de segurança na área de bacteriologia, deve-se colocar um pedaço de algodão sobre as pipetas no topo, em caso de acidentes o algodão serve de barreira.

Quando se deseja diluir reagentes como ácidos fortes, por exemplo ácido sulfúrico concentrado ou ácido clorídrico concentrado, deve-se levar em consideração que nunca será colocada água diretamente sobre eles, mas ao contrário; aos poucos o ácido vai se incorporando à água, tratando de tudo em uma capa de segurança.

A mesa de trabalho deve ser mantida sempre limpa e seca. Em caso de derramamento ou incêndio, não tente resolver o incidente com água.

Armazenamento de reagentes

Os rótulos dos frascos possuem uma faixa colorida que indica a qual grupo pertence: faixa vermelha inflamável, branco corrosivo, amarelo reativo, azul de risco à saúde, verde de baixo risco, faixas brancas e vermelhas ou brancas e preto incompatível.

Os itens do mesmo grupo geralmente podem ir juntos e cada grupo deve ser separado um do outro. Porém, há reagentes que, embora sejam do mesmo grupo, são incompatíveis entre si; eles devem ser separados. Verifique a etiqueta para incompatibilidades.

Ácidos e bases nunca devem ser armazenados juntos, da mesma forma, reagentes inflamáveis, corrosivos, oxidantes e peróxidos devem estar o mais longe possível uns dos outros (prateleiras separadas).

Os reagentes corrosivos devem estar na parte inferior da prateleira e os mais inofensivos na parte superior. Os potes altos vão para o topo na parte de trás da prateleira e os pequenos vão para a frente. Reagentes altamente perigosos requerem gabinetes de segurança.

Finalmente, a folha MSDS (Material Safety Data Sheets) para cada reagente deve ser sempre lida antes do manuseio.

Disposição final de resíduos químicos

A utilização de reagentes gera resíduos que devem ser descartados de forma a prejudicar o mínimo possível o meio ambiente.

Reagentes mais usados em laboratório clínico, composição e função

Fonte: Tabela elaborada pelo autor MSc. Marielsa gil

Fonte: Tabela elaborada pela autora Marielsa Gil