NEFELOMETRIA: EM QUE CONSISTE E APLICAÇÕES - QUÍMICA - 2025

A nefelometria envolve a medição da radiação causada por partículas (em solução ou suspensão) e a medição da potência da radiação espalhada em um ângulo em relação à direção da radiação incidente.

Quando uma partícula suspensa é atingida por um feixe de luz, uma parte da luz é refletida, outra parte é absorvida, outra é desviada e o resto é transmitido. É por isso que quando a luz atinge um meio transparente no qual há uma suspensão de partículas sólidas, a suspensão parece turva.

O que é nefelometria?

Dispersão de radiação por partículas em solução

No momento em que um feixe de luz atinge as partículas de uma substância suspensa, a direção de propagação do feixe muda de direção. Este efeito depende do seguinte:

1.Dimensões da partícula (tamanho e forma).

2. Características da suspensão (concentração).

3. Comprimento de onda e intensidade da luz.

4. Distância de luz incidente.

5. Ângulo de detecção.

6. Índice de refração do meio.

Nefelômetro

O nefelômetro é um instrumento usado para medir partículas suspensas em uma amostra líquida ou em um gás. Assim, uma fotocélula colocada em um ângulo de 90 ° em relação a uma fonte de luz detecta a radiação das partículas presentes na suspensão.

Da mesma forma, a luz refletida pelas partículas em direção à fotocélula depende da densidade das partículas. O Diagrama 1 apresenta os componentes básicos que compõem um nefelômetro:

Figura 1. Componentes básicos de um nefelômetro.

PARA.

Em nefelometria é de vital importância ter uma fonte de radiação com alto débito luminoso. São diversos tipos, que vão desde lâmpadas de xenônio e lâmpadas de vapor de mercúrio, lâmpadas halógenas de tungstênio, radiação laser, entre outras.

B.

Este sistema está localizado entre a fonte de radiação e a cubeta, de forma que, desta forma, a radiação com diferentes comprimentos de onda em relação à radiação desejada seja evitada na cubeta.

Caso contrário, reações de fluorescência ou efeitos de aquecimento na solução causariam desvios de medição.

C.

É um recipiente geralmente prismático ou cilíndrico e pode ter diferentes tamanhos. Esta é a solução em estudo.

D.

O detector está localizado a uma distância específica (geralmente muito próximo à cubeta) e é responsável por detectar a radiação espalhada pelas partículas em suspensão.

E.

Geralmente é uma máquina eletrônica que recebe, converte e processa dados, que neste caso são as medidas obtidas no estudo realizado.

Desvios

Cada medição está sujeita a uma porcentagem de erro, que é principalmente dada por:

Células contaminadas: nas células, qualquer agente externo à solução em estudo, seja dentro ou fora da célula, diminui a luz radiante a caminho do detector (células defeituosas, poeira aderida às paredes da célula).

Interferências: a presença de um contaminante microbiano ou turbidez dispersa a energia radiante, aumentando a intensidade da dispersão.

Compostos fluorescentes: são aqueles compostos que, quando excitados pela radiação incidente, causam leituras errôneas e de alta densidade de espalhamento.

Armazenamento do reagente: A temperatura inadequada do sistema pode causar condições adversas do estudo e pode levar à presença de reagentes turvos ou precipitados.

Flutuações na energia elétrica: para evitar que a radiação incidente seja uma fonte de erro, estabilizadores de tensão são recomendados para radiação uniforme.

Características metrológicas

Uma vez que a potência radiante da radiação detectada é diretamente proporcional à concentração de massa das partículas, os estudos nefelométricos têm, em teoria, uma sensibilidade metrológica mais elevada do que outros métodos semelhantes (como a turbidimetria).

Além disso, esta técnica requer soluções diluídas. Isso permite que os fenômenos de absorção e reflexão sejam minimizados.

Formulários

Os estudos nefelométricos ocupam uma posição muito importante nos laboratórios clínicos. As aplicações vão desde a determinação de imunoglobulinas e proteínas de fase aguda, complemento e coagulação.

Detecção de complexo imunológico

Quando uma amostra biológica contém um antígeno de interesse, ele é misturado (em uma solução tampão) com um anticorpo para formar um complexo imune.

A nefelometria mede a quantidade de luz que é espalhada pela reação antígeno-anticorpo (Ag-Ac) e, dessa forma, os complexos imunes são detectados.

Este estudo pode ser realizado por dois métodos:

Nefelometria de ponto final:

Essa técnica pode ser usada para análise de ponto final, em que o anticorpo da amostra biológica estudada é incubado por vinte e quatro horas.

O complexo Ag-Ac é medido usando um nefelômetro e a quantidade de luz espalhada é comparada com a mesma medição realizada antes da formação do complexo.

Nefelometria cinética

Neste método, a taxa de formação do complexo é monitorada continuamente. A taxa de reação depende da concentração do antígeno na amostra. Aqui as medições são feitas em função do tempo, então a primeira medição é feita no tempo "zero" (t = 0).

A nefelometria cinética é a técnica mais utilizada, pois o estudo pode ser realizado em 1 hora, em comparação ao longo período de tempo do método do ponto final. A proporção de dispersão é medida logo após a adição do reagente.

Portanto, desde que o reagente seja constante, a quantidade de antígeno presente é considerada diretamente proporcional à taxa de mudança.

Outros aplicativos

A nefelometria é geralmente usada na análise da qualidade química da água, para determinar a clareza e controlar seus processos de tratamento.

Também é usado para medir a poluição do ar, na qual a concentração das partículas é determinada a partir da dispersão que elas produzem em uma luz incidente.

Referências

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7. Wikipedia. (sf). Nefelometria (medicina). Recuperado de en.wikipedia.org