HAEMOPHILUS INFLUENZAE: CARACTERÍSTICAS, CULTURA, PATOGÊNESE, TRATAMENTO - BIOLOGIA - 2025

Algumas cepas de Haemophilus influenzae são encapsuladas e outras não. As cápsulas são tipificáveis ​​de acordo com o tipo de carboidrato que contêm. 6 tipos diferentes são conhecidos designados pelas letras a, b, c, d, e e f.

Em nível de laboratório, eles podem ser diferenciados pelo uso de anticorpos aglutinantes anti-soros contra o polissacarídeo correspondente.

As cepas capsuladas são patogênicas. Os do tipo b são os mais invasivos e frequentemente isolados em processos infecciosos graves. Embora os não capsulados sejam considerados microbiota habitual e, embora também possam causar infecções, geralmente não são invasivos e não representam um perigo maior.

Em nível de laboratório, eles são difíceis de isolar, pois requerem meios altamente enriquecidos para um desenvolvimento ideal, como ágar chocolate ou ágar Levithal.

É por isso que este microrganismo se enquadra no grupo das bactérias ditas exigentes do ponto de vista nutricional, embora alguns autores prefiram chamá-las de microrganismos irritantes.

Sua reação aos testes de catalase e oxidase é positiva. É um microrganismo anaeróbio aeróbio e facultativo que cresce bem a 35-37 ° C, em pH 7,6 e com 5% de CO ₂. Do ponto de vista bioquímico, esta bactéria é classificada em 8 biótipos, conforme proposto por Kilian.

A classificação é baseada nos resultados de certos testes, como indol, ornitina e urease.

Retirado da fonte: Pantigozo P, Aguilar E, Santivañez S, Quispe M. Haemophilus influenzae, sorotipagem e biotipagem de pacientes com IRAs do Hospital EsSalud-Cusco. SITUA 2006, 15 (1,2): 31-36. Disponível em: sisbib.unmsm.

Morfologia

Características microscópicas

Haemophilus influenzae é muito semelhante ao resto das espécies do gênero Haemophilus, uma vez que são bacilos coco muito pequenos e seu tamanho varia entre 0,2-0,3 µm de largura e 0,5-0,8 µm de comprimento.

No entanto, Haemophilus influenzae vistos ao microscópio são muito pleomórficos, ou seja, podem assumir diferentes formas. Estes podem ser vistos como bacilos muito curtos (cocobacilos) ou bacilos um pouco mais alongados e até mesmo filamentosos. Com a coloração de Gram, eles ficam vermelhos, ou seja, são Gram negativos.

Gram de uma amostra direta com Haemophilus influenzae e cocobacilos polimorfonucleares. Fonte: Microman12345

Morfologicamente são muito semelhantes ao gênero Pasteurella, mas este último apresenta uma coloração bipolar que os diferencia. Eles não são formadores de esporos. Também não possuem flagelos, portanto, são imóveis.

Características macroscópicas

Após uma incubação de 24 horas em ágar chocolate, desenvolvem-se colônias muito pequenas de formato convexo com 0,5 a 0,8 mm de diâmetro, aparência granular, transparente e opaca.

Em 48 horas de incubação, as colônias cresceram um pouco mais (1 a 1,5 mm). Ressalta-se que as colônias das cepas que possuem cápsulas tendem a ser mais mucoides e muito maiores, medindo até 3,0 mm.

Habitat

As cepas de Haemophilus influenzae colonizam a nasofaringe de crianças e adultos saudáveis ​​em 50-75%. Também é possível encontrar essa cepa no trato genital de alguns indivíduos.

Ciclo de vida

Haemophilus influenzae é uma bactéria patogênica humana exclusiva, cujo habitat natural é representado pelo trato respiratório superior do ser humano. Lá, a bactéria pode crescer e prosperar sem causar danos ao hospedeiro.

A reprodução é assexuada por fissão; neste tipo de reprodução, um organismo primeiro duplica seu material genético, depois forma duas novas células a partir de uma célula-tronco original.

Cultura

Haemophilus influenzae cultivado em ágar sangue. Tirado e editado de: Consulte a página do autor.

O termo Haemophilus é uma palavra composta, vem de duas palavras gregas, 'haemo', que significa sangue, e 'philus' que vem a ser afinidade.

Esta bactéria faz jus ao seu nome, uma vez que se desenvolve de forma excelente em ágar sangue aquecido (ágar chocolate). Também pode crescer em ágar sangue, mas precisa estar na companhia de uma cepa de S. aureus. Este último, sendo beta-hemolítico, quebra os eritrócitos e libera o fator V de que o Haemophilus necessita.

É assim que as colônias de Haemophilus podem se desenvolver perto da cepa de S. aureus. Esse fenômeno é conhecido como satélite e é frequentemente usado como estratégia de diagnóstico.

Teste de satélite (crescimento de H. influenzae ao redor do estriado de S. aureus em ágar sangue. Fonte: CDC-PHIL

Deve-se notar que a cepa Haemophilus influenzae não produz hemólise no ágar sangue, o que a diferencia de outras espécies de Haemophilus, como H. haemolyticus e H. parahaemolyticus.

Doenças (patogênese)

Esse microrganismo é transmitido por secreções, principalmente respiratórias (saliva e muco), emitidas por enfermos ou portadores da bactéria.

As bactérias viajam em secreções expelidas quando o paciente espirra ou tosse. As bactérias se espalham no meio ambiente e são inaladas pelo indivíduo suscetível.

O Haemophilus influenzae é um microrganismo piogênico, por isso gera secreções purulentas.

Entre as principais patologias que causa estão meningites, septicemias, pneumonias, epiglotites, conjuntivites e otites, entre outras.

Septicemia

Quando a bactéria entra na corrente sanguínea, é chamada de bacteremia e é a etapa crucial para a disseminação do microorganismo para outros órgãos ou tecidos. Quando o microrganismo se multiplica no sangue é denominado septicemia, essa condição compromete o estado geral do paciente.

Meningite

A meningite é uma doença grave que causa rigidez do pescoço, dor de cabeça, vômitos ou alterações de comportamento, podendo levar à morte em alguns casos. Esta infecção é comum em crianças.

Pneumonia

Ampliação (1000x) da expectoração de um doente com pneumonia, causada por Haemophilus influenzae. Retirado e editado de: Microman12345.

Ela se apresenta como uma complicação grave de uma infecção anterior do trato respiratório, como bronquite ou traqueobronquite febril aguda. Ele se apresenta com febre alta, dispneia ou tosse produtiva com expectoração purulenta. Pode coexistir com bacteremia. Este envolvimento é mais comum em adultos mais velhos.

Conjuntivite

A conjuntivite se apresenta com vermelhidão da conjuntiva, ardor, inchaço das pálpebras, presença de secreção purulenta ou hipersensibilidade à luz (fotofobia).

Sinusite

É uma infecção dos seios paranasais que causa congestão nasal e secreção abundante. O corrimento pode ser líquido ou espesso, esverdeado ou amarelado e com ou sem sangue. Outros sintomas incluem: tosse, febre, dor de garganta e pálpebras inchadas. Esse envolvimento geralmente é causado por cepas não encapsuladas.

Epiglotite

Apresenta dor de garganta intensa e súbita, febre, voz abafada ou incapacidade de falar, salivação, entre outros sinais. Isso ocorre devido ao edema obstrutivo da laringe gerado pela infecção. Pode causar morte por asfixia.

Diagnóstico

A melhor forma de fazer o diagnóstico é por meio da cultura. A amostra dependerá do processo infeccioso.

Se houver suspeita de meningoencefalite, uma amostra de líquido cefalorraquidiano deve ser coletada por punção lombar para estudo citoquímico e cultura. Em caso de septicemia, serão colhidas amostras de sangue para realização de uma série de hemoculturas.

Se o processo for conjuntivite, será retirada a secreção emitida por essa mucosa. No caso de pneumonia, uma amostra de escarro ou lavado brônquico é cultivada.

As amostras são semeadas em ágar chocolate e incubadas aerobicamente com 5% de CO ₂ por 48 horas de incubação.

A identificação pode ser feita por meio de testes bioquímicos manuais ou também por sistemas automatizados como o VITEK 2.

A sorotipagem é realizada por meio de anti-soros aglutinantes. As cepas de Haemophilus influenzae que não reagem a nenhum anti-soro são classificadas como não capsuladas ou não tipáveis.

O ágar Levithal permite distinguir entre cepas encapsuladas e não encapsuladas.

Tratamento

Haemophilus influenzae pode ser tratado com beta-lactâmicos, como ampicilina, ampicilina / sulbactam, amoxicilina / ácido clavulânico, piperacilina / tazobactam. Em infecções graves, geralmente são utilizadas cefalosporinas de terceira geração, como: ceftriaxona, cefotaxima e cefoperazona ou carbaperazonas.

É importante ressaltar que a ampicilina não está mais sendo usada porque atualmente a maioria das cepas isoladas são resistentes a esse antibiótico, devido à produção de uma beta-lactamase.

Macrolídeos e quinolonas também podem ser usados.

Porém, o mais aconselhável é fazer o antibiograma e colocar o tratamento de acordo com a sensibilidade relatada.

Prevenção

Após a introdução da vacina contra Haemophilus influenzae tipo b, a diminuição dos casos de meningite por esse microrganismo diminuiu significativamente.

Atualmente o antígeno capsular tipo b (polirribosil-ribitol-fosfato) de H. influenzae está incluído na vacina pentavalente que também previne difteria, tétano, coqueluche e hepatite B.

A vacina é administrada em 3 ou 4 doses. O esquema de 4 doses é o seguinte:

A primeira dose é iniciada aos 2 meses de idade. Em seguida, mais duas doses são administradas a cada dois meses (ou seja, aos 4 e 6 meses de idade). Finalmente, a quarta dose é aplicada 6 ou 9 meses após a colocação da terceira. A última dose representa o reforço.

Contra-indicação da vacina

A vacina é contra-indicada em:

- Pacientes que apresentaram reação anafilática (alérgica) grave aos componentes da vacina.

É importante não confundir efeitos colaterais com reação anafilática. As reações anafiláticas são respostas imunológicas graves que comprometem a vida do paciente. Enquanto isso, os efeitos adversos podem ser vermelhidão local no local da punção e febre.

- Também é contra-indicado em pacientes doentes ou com defesas baixas. Nestes casos, é necessário aguardar a recuperação das condições normais para administrar a vacina.

- Finalmente, a vacinação não é recomendada em crianças com menos de 6 semanas de idade.

Referências

1. Sakurada A. Haemophilus influenzae. Rev. chil. infectol. 2013; 30 (6): 661-662. Disponível em: scielo
2. Nodarse R, Bravo R, Pérez Z. Haemophilus Influenzae meningoencefalite em um adulto. Rev Cub Med Mil 2000, 29 (1): 65-69. Disponível em: scielo.sld
3. Toraño G, Menéndez D, Llop A, Dickinson F, Varcárcel M, Abreu M et al. Haemophilus influenzae: Caracterização de isolados recuperados de doenças invasivas em Cuba durante o período de 2008-2011. Vaccimonitor 2012; 21 (3): 26-31. Disponível em: scielo.
4. Leivaa J e Del Pozo J. Bacilos gram-negativos de crescimento lento: HACEK, Capnocytophaga and Pasteurella group. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2017; 35 (3): 29-43. Disponível em: Elsevier.
5. Valenza G, Ruoff C, Vogel U, Frosch M, Abele-Horn M. Avaliação microbiológica do novo cartão de identificação VITEK 2 Neisseria-Haemophilus. J Clin Microbiol. 2007; 45 (11): 3493–3497. Disponível em: ncbi.nlm.
6. Pantigozo P, Aguilar E, Santivañez S, Quispe M. Haemophilus influenzae, sorotipagem e biotipagem de pacientes com IRA no Hospital EsSalud-Cusco. SITUA 2006, 15 (1,2): 31-36. Disponível em: sisbib.unmsm.