HEMOCULTURA: PARA QUE SERVE, JUSTIFICATIVA, PROCEDIMENTO, RESULTADOS - BIOLOGIA - 2025

A hemocultura é um exame bacteriológico que visa detectar a presença de microrganismos no sangue. O sangue é um líquido estéril por natureza e, portanto, deve ser mantido em condições fisiológicas, de modo que a presença de bactérias ou fungos no sangue é sempre patológica.

Quando bactérias ou fungos são encontrados no sangue, mas a multiplicação não ultrapassa a eliminação de microorganismos pelo sistema imunológico, é denominado bacteremia (para bactérias) ou fungemia (para fungos); Mas se o número de microrganismos aumentar de forma incontrolável, isso é chamado de septicemia.

Frascos de hemocultura (amarelo: aerobiose pediátrica, verde: aerobiose adulta e vermelho: anaerobiose adulta). Fonte: fotografia tirada pela autora MSc Marielsa Gil.

Bacteremia, fungemia e septicemia colocam em risco a vida do paciente e, portanto, devem ser tratadas imediatamente. Por isso, quando há suspeita de infecção no sangue, os médicos solicitam uma hemocultura.

Esta análise bacteriológica permite saber se existe ou não infecção no sangue e qual o microrganismo envolvido. Além disso, se for positivo, é realizado um teste de sensibilidade para saber qual antibiótico ou antifúngico pode ser utilizado no tratamento.

Se, por outro lado, a hemocultura for negativa em 24 horas de incubação, não deve ser descartada até que seja negativa em 240 horas. Isso garante que não haja microrganismos de crescimento lento.

Para que uma hemocultura seja confiável, medidas assépticas extremas devem ser adotadas na coleta da amostra, e para aumentar a confiabilidade e sensibilidade do teste, pelo menos duas amostras devem ser coletadas durante ou próximo ao pico da febre.

Para que serve?

O sangue é um líquido estéril e, quando nele são encontrados microorganismos, é 100% patológico. Essa situação representa um quadro clínico muito delicado que compromete a vida do paciente.

A hemocultura é um importante teste bacteriológico que detecta a presença de microrganismos na corrente sanguínea.

Os microrganismos podem atingir o sangue por diferentes vias, podendo ser infecções extravasculares como: pneumonia, infecções intra-abdominais, pielonefrite, infecções graves da pele, tecidos moles ou artrite, entre outras.

Ou também pode ser por via intravenosa, por exemplo, contaminação de cateteres intravenosos ou arteriais, endocardite, dependência de drogas intravenosas, administração de drogas ou soluções contaminadas, etc.

Detectar e tratar o agente causador da sepse em tempo é essencial para garantir a sobrevivência do paciente.

Nesse sentido, o médico deve indicar a realização de hemocultura ao observar sinais e sintomas sugestivos de septicemia, tais como: febre (maior que 38 ° C) sem foco infeccioso aparente ou, ao contrário, hipotermia (<de 36 ° C).

Outros sinais podem ser: calafrios, aumento da contagem de leucócitos (> 10.000 células / mm ³) ou diminuição significativa das células polimorfonucleares (<1.000 PMN / mm ³). Bem como deterioração de vários órgãos ou perda de vitalidade repentina, entre outros sinais de alerta.

A bacteremia pode ser constante, transitória ou intermitente. Isso é importante na hora de colher uma amostra, pois é necessário retirá-la quando houver maior probabilidade de encontrar o microrganismo circulando.

Portanto, é recomendável coletar pelo menos 2 amostras em locais diferentes. Além disso, o ideal é que a amostra seja colhida em picos febris ou quando o paciente apresentar calafrios, hipotermia extrema, sudorese ou taquicardia.

Porém, para que a hemocultura seja uma ferramenta verdadeiramente útil, a amostra deve ser colhida com extremo cuidado. Uma má manipulação ou má assepsia no momento da retirada da amostra pode invalidar o teste, obtendo falsos positivos.

Base

O estudo consiste em colher duas ou três amostras de sangue assepticamente e colocá-las em frascos especiais.

Dispositivos especiais para a cultura de amostras de sangue são chamados de frascos de hemocultura. Estes são classificados em:

De acordo com a idade do paciente

- Uso pediátrico

-Para adultos.

De acordo com o tipo de microorganismo

-Lacas para microrganismos aeróbicos (bactérias aeróbias, bactérias facultativas e fungos).

- Frascos de cultura de sangue para microrganismos anaeróbicos (bactérias anaeróbicas estritas).

Alguns contêm um meio de cultura líquido e alguns contêm um meio de cultura sólido e líquido ao mesmo tempo. Eles também existem com partículas de carvão ativado.

Processo

Recomendações para amostragem

- A amostra deve ser colhida por pessoal altamente treinado e treinado na área de microbiologia.

- A assepsia ou limpeza completa do local de coleta da amostra é, sem dúvida, a etapa mais importante.

- Como em toda amostragem, o pessoal de saúde deve cumprir integralmente as medidas de biossegurança durante o processo (uso de luvas, bata, óculos, entre outros).

- Cuide para que todos os implementos necessários para a coleta de amostras estejam disponíveis.

- Rotule os frascos com o nome completo do paciente, data, número do prontuário, hora da coleta da amostra e número de sequência do laboratório.

-O ideal é colher a amostra antes de o paciente iniciar a terapia antimicrobiana. Só é indicada caso haja suspeita de não funcionamento do tratamento em curso. Nesse caso, a amostra deve ser colhida antes da troca do medicamento, utilizando frascos de hemocultura com inibidores de antibióticos (partículas de carvão ativado).

- Devem ser colhidas pelo menos 2 amostras em locais anatômicos diferentes, como o braço direito e o braço esquerdo. Na suspeita de endocardite, 3 amostras são recomendadas. Dois frascos (um para aerobiose e outro para anaerobiose) serão incluídos em cada amostra.

Quantidade de amostra

A quantidade de amostra varia de acordo com a idade do paciente, mas a relação 1: 5 a 1:10 deve ser sempre mantida em relação à diluição do sangue / caldo de cultura.

Em recém-nascidos, a quantidade de amostra recomendada é de 1 ml de sangue por frasco. Frasco pediátrico é usado.

No caso de crianças entre um mês e um ano, pode ser aumentado para 1,5 ml de sangue por frasco. Frasco pediátrico é usado.

Em crianças com mais de 2 anos, a quantidade de amostra apropriada é 2,5 ml de sangue por frasco. Frasco pediátrico é usado.

A partir da adolescência, pode ser aumentado para um volume de sangue entre 5 - 10 ml por frasco. Uma garrafa adulta é usada.

Finalmente, na fase adulta, a quantidade necessária é de 8-10 ml por frasco. Uma garrafa adulta é usada.

Amostragem

- A amostra de sangue pode ser venosa ou arterial. No entanto, o sangue arterial é coletado apenas quando a amostra venosa é impossível.

- Não é recomendado coletar uma amostra de um cateter venoso central, a menos que:

1. É impossível colher a amostra perifericamente (venosa ou arterial).
2. Pacientes com risco de sangramento.
3. Quando o médico suspeita de bacteremia por contaminação do cateter venoso central.
4. Quando a febre reaparece após uma cessação febril de 4 a 5 dias, independentemente de o paciente estar ou não em tratamento antimicrobiano.

Assepsia antes da amostragem

- Escolha os locais anatômicos para amostragem. Geralmente, são escolhidas as veias do melhor calibre (veia basílica ou cefálica).

- De acordo com o Center for Disease Control (CDC) de Atlanta (EUA), o operador deve lavar as mãos com clorexidina 2% ou iodo povidona 10% antes da amostragem, além de usar luvas.

-Palpe e localize a veia a ser utilizada.

-Limpe a área da punção de forma rotativa, fazendo movimentos do centro para fora com clorexidina e sabão ou sabonete anti-séptico. Enxágüe com solução salina estéril.

Em seguida, aplique um anti-séptico e deixe agir. Exemplo de gluconato de clorexidina 0,5% durante 1 minuto ou iodo povidona a 10% durante 2 minutos. Para este último, pergunte primeiro se o paciente é alérgico ao iodo. Se você é alérgico, pode substituir o álcool a 70%.

Extração de amostra

- Coloque o torniquete para exacerbar o fluxo sanguíneo e brotar a veia.

- Não toque no local da punção com o dedo novamente. Se for estritamente necessário, o dedo deve ser lavado da mesma forma que a área da punção.

-Insira a agulha injetora ou o couro cabeludo na veia e extraia a quantidade de sangue necessária.

-Não coloque algodão ou gaze na agulha ao removê-la se não estiver estéril.

-Retire o selo de segurança dos frascos com muito cuidado e sem tocar na tampa. Alguns autores recomendam fazer uma desinfecção da tampa antes de inocular a amostra.

- Distribua a quantidade adequada de sangue nos frascos. Se a amostra for coletada com um injetor, a quantidade necessária é primeiro vertida no balão anaeróbio e, em seguida, no aeróbio. Se a retirada for feita com couro cabeludo (borboleta), despeje-se no sentido oposto.

- Misture o frasco de hemocultura suavemente por inversão.

- Troque as luvas e repita as etapas anteriores para a segunda coleta de amostra.

-Se a segunda amostra for retirada de um site diferente, pode ser feito imediatamente, mas se for do mesmo site, deve-se aguardar 30 a 90 minutos entre uma amostra e outra.

- A amostra deve ser levada ao laboratório o mais rápido possível, caso isso não seja possível deve ser deixada em temperatura ambiente por até 18 horas.

Cultura

Uma vez no laboratório, os frascos são incubados a 37 ° C nas condições de cada frasco, ou seja, em aerobiose e anaerobiose respectivamente.

No método manual, o toque deve ser iniciado às 24 horas de incubação e, em seguida, inter-diário. Os anéis são realizados da seguinte forma: primeiro a tampa do frasco é desinfetada e a agulha de um injetor estéril é inserida. O líquido é extraído do frasco e semeado em ágar sangue e ágar chocolate.

Se houver crescimento, é realizado Gram, subcultivos em meios específicos, testes bioquímicos e antibiograma.

Nos métodos automatizados, o equipamento Bact / Alert emite um alarme ao detectar que um frasco é positivo. Da mesma forma, deve ser batido em ágar sangue e ágar chocolate.

Outro método que vem ganhando espaço é a análise do frasco após 6 horas de incubação por meio de espectrometria de massa. Esse método ajudou a aumentar a sensibilidade e a velocidade do diagnóstico.

Resultados

Desde que o frasco de hemocultura seja negativo, relatórios intermediários preliminares podem ser fornecidos ao médico assistente. O laudo indica que é negativo nas horas de incubação. Por exemplo, se ficar negativo até o quarto dia, será relatado da seguinte forma:

Resultado preliminar: cultura negativa 96 horas de incubação.

Nota: o estudo continua por 240 horas.

Se a hemocultura for positiva, o médico assistente é imediatamente informado e é enviado um laudo com pelo menos o grama da colônia. Exemplo:

Resultado preliminar: em cultura positiva às 48 horas de incubação, observam-se bacilos Gram negativos e oxidase negativa. Identificação e testes de sensibilidade estão em andamento.

Essas informações orientam o médico assistente a iniciar uma terapia empírica para o possível microrganismo, enquanto aguarda o resultado final do laboratório.

Após a conclusão do estudo bacteriológico, ou seja, o microrganismo foi identificado e o antibiograma está disponível, o laudo final deve ser enviado o quanto antes.

Deve-se ter cuidado especial se o microrganismo-alvo for Neisseria gonorrhoeae ou Neisseria meningitidis, pois essas bactérias são inibidas na presença de altas concentrações de polianetosulfonato de sódio (SPS).

É por isso que esse composto não deve exceder 0,025% em frascos de hemocultura.

Por outro lado, se a amostra de hemocultura for coletada primeiro em tubos Vacutainer, esses tubos apresentam concentrações de SPS tóxicas para meningococos e gonococos, portanto, o sangue deve ser transferido em 1 hora para o sistema de cultura em caldo.

Como saber se uma hemocultura é positiva ou contaminação

Uma hemocultura é considerada contaminada quando há crescimento em apenas um frasco de hemocultura do total colhido. E a suspeita de contaminação aumenta se o microrganismo isolado for uma microbiota cutânea habitual: exemplo: Staphylococcus coagulase negative, Propionibacterium spp, entre outros.

No entanto, em pacientes imunocomprometidos, nenhum microrganismo deve ser desprezado, mas neste caso o microrganismo deve aparecer em várias amostras.

Por outro lado, se a sensibilidade aos antibióticos de um mesmo microrganismo isolado em duas amostras diferentes for a mesma, a infecção é real.

Outra característica é a carga bacteriana, uma vez que as hemoculturas contaminadas crescem tarde, enquanto as infecções reais em pacientes não tratados geralmente são positivas com 14 horas de incubação, quando o microrganismo não incomoda.

Por outro lado, em pacientes tratados com antimicrobianos, o microrganismo envolvido pode demorar para crescer porque a carga é muito baixa.

O aparecimento de mais de um microrganismo pode sugerir contaminação, mas se o mesmo resultado se repetir em vários disparos de locais diferentes, então é real.

Referências

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