MEIO CARY BLAIR: JUSTIFICATIVA, PREPARAÇÃO E USOS - BIOLOGIA - 2025

O Cary Blair médio é um ágar semissólido, utilizado para o transporte e conservação de amostras biológicas contendo patógenos intestinais, microorganismos e lábil anaeróbicos. Como todo meio de transporte, sua função é manter a amostra em ótimas condições até que seja cultivada. Os microrganismos patogênicos presentes, assim como a microbiota que os acompanha, devem permanecer viáveis, mas sem aumentar sua população.

O meio Cary Blair é o resultado da mudança de formulação do meio de transporte Stuart. A modificação foi realizada em 1964 e consistiu na substituição do sistema regulador de pH (glicerofosfato) por um tampão inorgânico fosfatado.

A. Culturette com meio Cary Blair B. Coletor de fezes com meio Cary Blair. Fonte: A. Vídeo Meganhow, obter uma cultura de feridas 2011 youtube.com B. Usuário: Mattes

A reformulação foi necessária porque seus criadores perceberam que o glicerofosfato após um certo tempo poderia ser metabolizado por algumas bactérias saprofíticas. Estes se multiplicam sobre os patógenos presentes.

Outras alterações foram a eliminação do azul de metileno, bem como o reajuste do pH para alcalinidade (pH 8,4). Todas essas mudanças melhoraram a eficiência dos meios de transporte.

Originalmente, o meio Cary Blair era usado para a manutenção de patógenos intestinais, como Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae e Campylobacter sp.

No entanto, a eficácia em preservar a viabilidade de patógenos exigentes e instáveis, como: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae e alguns anaeróbios, foi posteriormente observada.

Base

O meio Cary Blair contém cloreto de sódio, tioglicolato de sódio, fosfato dissódico, cloreto de cálcio e ágar.

O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico do meio, o fosfato dissódico e o cloreto de cálcio equilibram o pH. Por sua vez, o tioglicolato de sódio mantém um baixo potencial de oxidação-redução, enquanto a pequena porção de ágar fornece a consistência semissólida.

O meio Cary Blair não contém substâncias nutritivas, pois a função de meio de transporte é manter a amostra sem que ela sofra alterações em termos de umidade e carga microbiana; ou seja, evita a desidratação da amostra preservando a viabilidade e a quantidade dos microrganismos presentes.

Por fim, o pH levemente alcalino evita a morte de microorganismos por acidez, principalmente Vibrios são muito sensíveis aos ácidos.

Preparação

O meio Cary Blair está disponível comercialmente como um dispositivo especial pronto para uso. O sistema de transporte é coberto por um saco plástico Peel Pack. Em seu interior, contém um cotonete para a coleta da amostra e o tubo recipiente para o meio semissólido de Cary Blair.

Também no mercado existem casas comerciais que fornecem o meio desidratado para seu preparo em laboratório.

Para isso, pese 13,2 g do meio desidratado e dissolva em um litro de água destilada. Aqueça e agite a preparação até que esteja completamente dissolvida. Distribua o meio em tubos de ensaio com tampa de rosca (baquelite).

Cozinhe os tubos por 15 minutos. Deixe esfriar e mantenha em temperatura ambiente até o uso.

O meio Cary Blair não inoculado pode ser armazenado de forma ideal por até 18 meses em temperatura ambiente.

O pH do meio deve ser ajustado para 8,4 ± 0,2. A cor do meio preparado é bege, com uma certa opalescência.

Usar

Tipo de amostras

O Cary Blair Medium é usado quando as amostras de fezes, esfregaços retais e esfregaços vaginais não podem ser processados ​​imediatamente.

Quando nenhum meio de transporte está disponível, as amostras podem ser armazenadas a -70 ° C.

Amostragem

A zaragatoa é impregnada com a amostra e introduzida no meio Cary Blair, sem atingir o fundo.

Identificação da amostra

O meio Cary Blair deve ter uma etiqueta onde são colocados os dados básicos, tais como: nome e sobrenome do paciente, número de identificação da amostra, origem da coleta da amostra, médico assistente, data e hora da coleta. amostra, diagnóstico presuntivo, tratamento com antibióticos.

Transferir

Bem coberto e transportado à temperatura ambiente no caso de amostras fecais. Já para amostras vaginais em busca de microrganismos anaeróbios, é recomendado o transporte das amostras a 4 ° C.

Em todos os casos, o tempo de transferência recomendado é de 4 a 6 horas, com um máximo de 24 horas.

Se houver suspeita da presença de Campylobacter jejuni nas amostras de fezes e estas não puderem ser processadas em 24 horas, o armazenamento em meio Cary Blair a 4 ° C é recomendado.

Investigações realizadas no meio de transporte Cary Blair

Vários estudos têm demonstrado que o meio Cary Blair pode permanecer viável para microrganismos enteropatogênicos do gênero Shigella e Salmonella por até 49 dias após a coleta da amostra.

Vibrio cholerae, outro importante patógeno intestinal, é capaz de sobreviver por 22 dias, enquanto a Yersinia pestis (agente causador da peste bubônica e pneumônica) pode ser recuperada após 75 dias.

Porém, apesar da durabilidade demonstrada em termos de recuperação desses microrganismos, recomenda-se que as amostras colhidas sejam transportadas em meio Cary Blair para o laboratório o mais rápido possível.

Da mesma forma, assim que a amostra chegar ao laboratório, deve ser semeada sem demora nos respectivos meios de cultura.

Por outro lado, o meio Cary Blair, além de ser útil para o transporte de microrganismos facultativos, também é recomendado para amostras que contenham patógenos anaeróbios.

Nesse sentido, DeMarco et al., Em 2017, realizaram um estudo intitulado: Sobrevivência de microrganismos vaginais em três sistemas de transporte disponíveis comercialmente.

Eles demonstraram que o meio de transporte Cary Blair é o melhor meio de transporte para a preservação e recuperação de microrganismos anaeróbios vaginais. Da mesma forma, eles mostraram que a maior taxa de recuperação foi alcançada quando a temperatura de transferência foi de 4 ° C.

Portanto, conclui-se que a temperatura de transporte para esfregaços vaginais (microrganismos anaeróbios) deve ser de 4 ° C. Já para amostras fecais em busca de microorganismos facultativos, a temperatura ideal é a ambiente.

Controle de qualidade

Para avaliar o controle de qualidade do meio de transporte Cary Blair, as cepas conhecidas como Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae e Campylobacter sp.

O meio é inoculado com a cepa escolhida e mantido em temperatura ambiente por 24 horas. Em seguida, são semeados nos meios de cultura correspondentes. Em todos os casos, espera-se uma recuperação satisfatória do microrganismo em questão.

Referências

1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, et al. Sobrevivência de microrganismos vaginais em três sistemas de transporte disponíveis comercialmente. Anaeróbio. 2017; 45: 44–49.
2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Comparação de meios de preservação para armazenamento de amostras de fezes. J Clin Microbiol. novecentos e noventa e cinco; 33 (8): 2176–2178.
3. Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Comparação de meios de preservação e condições de congelamento para armazenamento de amostras de fezes. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
4. Koneman E, Allen S, Janda W., Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnóstico microbiológico. 5ª ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Microbiological Diagnosis. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
6. Laboratórios Conda Pronadisa. Meio Cary Blair. Disponível em: condalab.com
7. Laboratório Metrix. Cary Blair. Disponível em: metrixlab.mx