O QUE É UMA COLORAÇÃO SIMPLES? CARACTERÍSTICAS PENDENTES - BIOLOGIA - 2024

A coloração única é um procedimento de coloração rápido e simples em que se utiliza um único corante, por isso é denominado simples. É usado principalmente para determinar a morfologia e a organização das células presentes em uma amostra.

As células são naturalmente incolores, por isso é necessário torná-las visíveis de alguma forma quando vistas ao microscópio.

Células da bochecha humana coradas por coloração simples com azul de metileno.

É importante ressaltar que os corantes utilizados na coloração simples devem ser básicos com carga positiva (catiônica), para que possam se ligar espontaneamente à parede celular e ao citoplasma.

Essas estruturas celulares são carregadas negativamente. É por isso que o corante carregado positivamente é atraído pelas células e se liga espontaneamente a elas. Assim, todas as células presentes em uma amostra são rapidamente coradas.

Corantes usados ​​em coloração simples

Existem vários corantes básicos que podem ser usados ​​no laboratório de microbiologia. Os mais usados ​​são:

- Azul de metileno.

- Violeta de cristal.

- Verde malaquita.

- Fucsina básica.

Todos esses corantes funcionam bem em bactérias porque têm íons coloridos (cromóforos) carregados positivamente (catiônicos).

Os tempos de coloração para a maioria dessas manchas são relativamente curtos. Geralmente variam de 30 segundos a 2 minutos, dependendo da afinidade do corante.

É importante lembrar que antes de tingir uma amostra por coloração simples, ela deve ser estendida e fixada na lâmina de vidro (lâmina); a amostra estendida e fixa é chamada de esfregaço.

Os 6 passos para uma coloração simples

Passo 1

Coloque a lâmina em uma prateleira de coloração e aplique a tinta desejada. Deixe o tempo correspondente agir.

A coloração simples normalmente leva de alguns segundos a alguns minutos, dependendo da coloração usada.

Observação

Nesta etapa é importante não ultrapassar o tempo recomendado para o corante utilizado, uma vez que podem se formar cristais na folha, produzindo os chamados "artefatos" que distorcem a morfologia das células.

Passo 2

Lave bem o esfregaço da lâmina com água destilada de uma garrafa ou também água corrente da torneira, até que o escoamento fique claro. Isso geralmente leva de 5 a 10 segundos.

Observação

Não aplique o jato d'água diretamente sobre o esfregaço, para evitar que a força do mesmo prejudique a amostra.

Se você não tiver água destilada, pode usar água da torneira sem problemas, pois não afetará o resultado da coloração.

etapa 3

Seque a lâmina com toalhas de papel absorventes em uma direção e sem esfregar. Certifique-se de que a parte inferior da lâmina esteja limpa.

Passo 4

Observe o esfregaço manchado ao microscópio. Comece com os objetivos mais distantes para localizar adequadamente a área que você deseja observar com mais detalhes. Mude o objetivo para ficar cada vez mais perto da amostra.

Observação

Para a utilização da objetiva com maior aumento (normalmente 100X), deve-se usar óleo de imersão, pois ajuda a luz a penetrar melhor e a imagem mais nítida. Não é necessário usar uma lamela.

Etapa 5

Finalmente, descarte todas as amostras em um recipiente apropriado, devidamente rotulado como "risco biológico".

Referências

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