- Processo
- Procedimento técnico
- Para que serve a baciloscopia?
- Esfregaço negativo
- Esfregaço positivo
- Referências
O esfregaço é uma ferramenta diagnóstica para tuberculose pulmonar ativa. É uma técnica laboratorial que permite a detecção e dosagem de bacilos álcool-ácido resistentes, como o Mycobacterium tuberculosis. É o método mais utilizado mundialmente para fazer o diagnóstico da tuberculose pulmonar ativa na comunidade e para avaliar os benefícios do tratamento.
A tuberculose pulmonar é uma doença infecciosa causada pelo Mycobacterium tuberculosis que infecta os pulmões, mas pode afetar outros órgãos e sistemas. Em todo o mundo, mais de 6 milhões de pessoas sofrem de tuberculose pulmonar (TB).
Células de M. tuberculosis em um esfregaço de escarro (Fonte: Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) via Wikimedia Commons)
Mycobacterium tuberculosis e outras espécies de Mycobacterium não tuberculosas possuem um revestimento lipídico na parede celular que é rico em ácido micólico, que é resistente à descoloração do álcool ácido após a coloração com corantes básicos.
Portanto, métodos de coloração especiais, como o método Ziehl-Neelsen, são usados. Esses métodos simples e baratos permitem que a parede retenha a mancha quando a amostra é enxaguada com uma solução ácida, e a parede do Mycobacterium fica vermelha em contraste com outras bactérias que ficam azuis.
Para fazer uma baciloscopia, é necessária uma amostra de escarro, de preferência colhida pela manhã, ao se levantar. Amostras de tecido ou amostras de fluidos corporais também podem ser usadas.
Processo
As amostras a serem processadas para microscopia de esfregaço são amostras de escarro, amostras de tecido ou amostras de fluidos corporais. As amostras de tecido podem ser extraídas por broncoscopia ou por biópsias de gânglios linfáticos ou outros tecidos.
Como a tuberculose pode afetar qualquer órgão ou sistema, as amostras podem ser muito variadas, incluindo: amostras de urina, líquido cefalorraquidiano, líquido pleural, líquido ascítico, sangue, pus de cavidades abertas, biópsias etc.
As amostras de lesões extrapulmonares também devem ser processadas para cultura. As amostras de escarro são coletadas nas primeiras horas da manhã ao levantar.
Várias amostras podem ser coletadas em uma fileira ou em dias consecutivos. As amostras devem ser rotuladas em frascos fechados e de boca larga. Devem ter os dados do paciente, o tipo de amostra e a data da coleta da amostra.
Procedimento técnico
- Uma vez obtida a amostra, ela pode ser centrifugada para se concentrar ou utilizada diretamente. O procedimento inicial consiste em colocar algumas gotas da amostra e espalhar sobre uma lâmina.
- A amostra é coberta com fucsina filtrada (solução de coloração).
- Depois é aquecido até obter cerca de três emissões de vapor esbranquiçado.
- Espere cinco minutos para que a amostra esfrie e lave-a com água.
- É coberto com solução clareadora (álcool ácido) por um período de 2 minutos.
- É lavado novamente com água.
- A amostra é coberta com azul de metileno e deixada em repouso por um minuto.
- Lavar com água.
- Deixe secar ao ar e proceda à observação ao microscópio.
Fotografia de um microscópio (imagem de Konstantin Kolosov em www.pixabay.com)
Este procedimento é rápido, simples, barato e permite que as células do Mycobacterium tuberculosis corem de vermelho. Essa técnica é chamada de técnica de coloração de Ziehl-Neelsen.
A observação microscópica consiste na identificação da presença de bacilos álcool-ácido resistentes e sua quantificação por campo.
As células do Mycobacterium tuberculosis aparecem como bastonetes vermelhos, granulares e curvos sobre um fundo azul. Eles podem ser isolados, emparelhados ou agrupados. A observação deve ser feita por campo e pelo menos 100 campos devem ser examinados para cada esfregaço.
O resultado é considerado positivo quando existem, em cada campo, mais de 10 células de M. tuberculosis. Isso corresponde a 5.000 a 100.000 bacilos para cada mililitro de amostra.
Nestes casos, é considerado positivo para Mycobacterium tuberculosis, uma vez que o Mycobacterium não tuberculoso ou outras bactérias resistentes aos ácidos apresentam formas diferentes e geralmente a quantidade observada por campo é inferior a 10.
O examinador da amostra deve ter experiência ou expertise na detecção e reconhecimento desses microrganismos, uma vez que podem existir falsos negativos ou falsos positivos nos resultados.
Existem outras técnicas fluoroscópicas que são mais sensíveis, mas muito mais caras. Uma dessas técnicas usa a coloração com Auramina-O, para obter uma fluorescência verde, ou a coloração com Auramina O / Rodamina B, para observar uma fluorescência amarela / laranja.
Os casos positivos são geralmente realizados para cultura e antibiograma para confirmação do diagnóstico e seleção adequada do tratamento.
Para que serve a baciloscopia?
A tuberculose é uma doença infecciosa que afeta os pulmões e outros órgãos e sistemas do corpo. É uma doença contagiosa que produz lesões graves no aparelho respiratório que, se não tratada adequadamente, pode levar à morte do paciente.
A tuberculose é transmitida quase exclusivamente por gotículas suspensas no ar pela expectoração de um paciente infectado com tuberculose pulmonar. Essas pequenas gotículas podem permanecer no ar e infectar a pessoa que as inala.
Células de M. tuberculosis (Fonte: NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) via Wikimedia Commons)
A infecção requer tempo de contato prolongado com um paciente infectado que cospe bacilos continuamente em um ambiente mal ventilado. Pessoas com imunodeficiências têm maior probabilidade de serem infectadas.
Os pacientes HIV-positivos têm maior probabilidade do que o resto da população de desenvolver infecções respiratórias graves, incluindo tuberculose pulmonar. Daí a importância da baciloscopia como método diagnóstico rápido e barato para tuberculose.
A baciloscopia permite o diagnóstico bacteriológico da tuberculose, porém o resultado positivo deve ser confirmado com outros estudos.
Os estudos que confirmam o diagnóstico de tuberculose incluem exames radiológicos que mostram imagens características nos lobos superiores do pulmão, testes tuberculínicos positivos e culturas de amostras positivas.
Esfregaço negativo
A baciloscopia negativa não exclui necessariamente o diagnóstico de tuberculose, pois principalmente quando a amostra é de escarro, a eliminação do bacilo não é constante. Portanto, nesses casos, quando há suspeita do diagnóstico, são necessárias amostras seriadas.
Esfregaço positivo
Uma baciloscopia positiva é indicativa de tuberculose e deve ser confirmada com outros estudos complementares. Sempre que o resultado for positivo, deve-se fazer cultura e antibiograma.
Uma vez estabelecido o tratamento, uma diminuição sustentada na escala de positividade da baciloscopia até a obtenção de resultados negativos, permite controlar os benefícios do tratamento.
Referências
- Aziz, MA (2002). Avaliação de qualidade externa para baciloscopia de BAAR.
- Desikan, P. (2013). Esfregaço de escarro na tuberculose: ainda é relevante? The Indian Journal of Medical Research, 137 (3), 442.
- Fauci, AS, Kasper, DL, Hauser, SL, Jameson, JL, & Loscalzo, J. (2012). Princípios de medicina interna de Harrison (Vol. 2012). DL Longo (Ed.). Nova York: Mcgraw-hill.
- Ngabonziza, JCS, Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M.,… & Muvunyi, CM (2016). Desempenho diagnóstico de baciloscopia e rendimento incremental de Xpert na detecção de tuberculose pulmonar em Ruanda. Doenças infecciosas de BMC, 16 (1), 660.
- Sardiñas, M., García, G., Rosarys, MM, Díaz, R., & Mederos, LM (2016). Importância do controle de qualidade da baciloscopia em laboratórios que realizam o diagnóstico da tuberculose. Jornal chileno de infectologia: órgão oficial da Sociedade Chilena de Infectologia, 33 (3), 282-286.
- Sequeira de Latini, MD, & Barrera, L. (2008). Manual para o diagnóstico bacteriológico da tuberculose: normas e guia técnico: parte 1 baciloscopia. No Manual para o diagnóstico bacteriológico da tuberculose: normas e guia técnico: parte 1 baciloscopia (pp. 64-64).