- Caracteristicas
- Diferenças entre meios de cultura e meios de enriquecimento
- Tipos e usos de ágar enriquecido
- - ágar sangue
- Nutriente ágar base
- Base de ágar de infusão de cérebro e coração
- Trypticasein Soy Agar Base
- Base de Agar Müeller Hinton
- Base de Agar Thayer Martin
- Base de ágar Columbia
- Base de ágar Brucella
- Base de ágar Campylobacter
- - ágar chocolate
- Base de ágar Columbia
- Base agar GC base
- Base de Agar Müeller Hinton
- Base com ágar Thayer Martin
- Referências
O meio de cultura enriquecido consiste na combinação de um ágar nutriente como base mais uma substância ou composto enriquecido. Os meios enriquecidos por excelência são ágar sangue e ágar chocolate.
Ambos os meios podem ser preparados com uma base simples de qualquer ágar nutriente, como ágar nutriente, ágar tripticaseína soja ou ágar de infusão cérebro-coração, entre outros. Da mesma forma, ambos os meios são complementados com um elemento altamente enriquecido que é o sangue, com a diferença de que no primeiro caso se utiliza desfibrinado e no segundo se utiliza aquecido.
Duas placas de ágar sangue (meio de cultura enriquecido) mostrando beta-hemólise. Fonte: Pixabay.com
Esses meios não contêm inibidores, portanto, uma grande variedade de microrganismos pode crescer neles, incluindo algumas cepas nutricionalmente exigentes. Nos casos que já são extremamente exigentes requerem, além do sangue, outros aditivos nutricionais especiais, que devem ser adicionados ao meio em que se pretende isolar.
Por outro lado, se forem adicionados antibióticos ou outras substâncias inibidoras a um meio enriquecido, ele imediatamente se torna um meio enriquecido seletivo. Estes últimos são necessários quando se tenta isolar microrganismos altamente exigentes de uma área rica em microbiota, como Haemophilus sp e Neisseria meningitidis isolados de uma amostra de exsudato nasofaríngeo.
Caracteristicas
Esses meios possuem uma base nutricional composta por peptonas, extratos de levedura, digestão pancreática e às vezes glicose, entre outros. Ele também contém substâncias que equilibram o pH, água e ágar-ágar.
Por outro lado, pode-se adicionar sangue desfibrinado ou aquecido e, por sua vez, podem ser incluídos fatores de crescimento específicos, tais como: complexos vitamínicos, biotina, ácido para-aminobenzóico, hemina, NAD, entre outros.
Diferenças entre meios de cultura e meios de enriquecimento
É importante ressaltar que meios de cultura enriquecidos não devem ser confundidos com meios de enriquecimento. Embora ambos contenham nutrientes e necessidades nutricionais especiais, os meios de enriquecimento são líquidos e são usados como um pré-tratamento de amostras em que se suspeita da presença de um tipo de bactéria patogênica encontrada em menor extensão em uma mistura polimicrobiana.
O meio de enriquecimento inibirá microorganismos que não pertencem a este grupo e promoverá o crescimento do patógeno.
Além disso, têm a propriedade de reparar danos à estrutura celular do microrganismo a ser recuperado, uma vez que normalmente pode ser afetado por tratamentos anteriores recebidos e, neste sentido, o meio atua aumentando sua viabilidade.
Tipos e usos de ágar enriquecido
O ágar enriquecido mais utilizado é o ágar sangue, mas pode ser preparado com várias bases nutricionais e, dependendo delas, sua utilidade muda.
Por outro lado, existe também o ágar chocolate, que é um meio enriquecido por excelência. Porém, como o ágar sangue, pode ser preparado com diversas bases nutricionais, além de incluir outros aditivos para o isolamento de microrganismos fastidiosos.
A seguir, um resumo das bases de ágar mais utilizadas para o preparo de ágar sangue e ágar chocolate, bem como sua utilidade em cada caso.
- ágar sangue
Cultura em ágar sangue da bactéria anaeróbia facultativa Morganella morganii. Retirado e editado de: Bacteria in Photos.
Preparado com:
Nutriente ágar base
É utilizado para bactérias não exigentes, como: Enterobacteriaceae, Pseudomonas sp, S. aureus, Bacillus sp, entre outras. Não é adequado para bactérias fastidiosas como Streptococcus.
Base de ágar de infusão de cérebro e coração
O ágar sangue com esta base é excelente para a maioria das bactérias, incluindo Streptococcus sp, mas não é recomendado para observar padrões de hemólise. Esta combinação com certos aditivos é útil para certos microrganismos. Exemplos:
Se cistina e glicose são adicionadas a este meio, ele é usado para isolar Francisella tularensis. Ao passo que, se for adicionado telurito de cistina, é útil isolar Corynebacterium diphteriae.
Da mesma forma, este meio é usado para isolar bactérias do gênero Haemophilus, mas neste caso é necessário adicionar bacitracina, amido de milho, sangue de cavalo e outros suplementos de enriquecimento como (IsoVitaleX).
Por fim, se incluído em sua preparação (cloranfenicol - gentamicina) ou (penicilina - estreptomicina) com sangue de cavalo, é ideal para o isolamento de Histoplasma capsulatum.
Trypticasein Soy Agar Base
É excelente para promover o crescimento de uma grande variedade de microrganismos, incluindo Streptococcus sp, sendo o mais recomendado para observar padrões de hemólise.
Se suplementado com telurito de cistina e sangue de cordeiro, é ideal para Corynebacterium diphteriae.
Base de Agar Müeller Hinton
Ideal para antibiogramas de microrganismos complicados como Streptococcus sp, bem como para o isolamento de Legionella pneumophila.
Base de Agar Thayer Martin
É ideal para isolar as espécies de Neisseria meningitidis.
Base de ágar Columbia
É especial para o isolamento de Helicobacter pylori e Gardnerella vaginalis. Para maior sucesso, diferentes tipos de antibióticos são adicionados para inibir a microbiota que o acompanha.
Base de ágar Brucella
A combinação de sangue de cordeiro, vitamina K e ágar Brucella é excelente para o cultivo de bactérias anaeróbias.
Base de ágar Campylobacter
Como o próprio nome indica, essa base é usada para isolar Campylobacter jejuni em amostras de fezes. Para isso, é suplementado com 5% de sangue de ovelha e cefalotina, anfotericina B, trimetoprima, polimixina B e vancomicina.
- ágar chocolate
Ágar chocolate
Preparado com:
Base de ágar Columbia
A preparação do ágar chocolate com esta base é amplamente utilizada para isolar bactérias do gênero Neisseria.
Também é recomendado para o isolamento de Brucella sp, mas para isso deve-se adicionar vitamina K e usar sangue de cavalo.
Base agar GC base
É uma das bases recomendadas para fazer ágar chocolate, principalmente para o isolamento de gonococos.
Base de Agar Müeller Hinton
Alguns microrganismos fastidiosos, como Streptococcus pneumoniae, requerem esse meio para realizar o teste de sensibilidade aos antimicrobianos.
Também é útil no isolamento de Neisserias e Haemophilus, exceto que o gênero Haemophilus prefere o sangue de cavalo, por ser rico em fator X (hemina) e V (NAD).
Às vezes, é aconselhável incluir antibióticos em sua preparação para inibir a microbiota que o acompanha.
Base com ágar Thayer Martin
Recomenda-se o uso de sangue de cordeiro para preparar o ágar chocolate com esta base. Este meio é especial para o isolamento de Neisseria gonorrhoeae. Antibióticos são adicionados para inibir a microbiota que o acompanha.
Agar de chocolate (meio de cultura enriquecido): Fonte: Pixinio.com
Referências
- Prescott M, Harley P, Klein A. Microbiology, 4th. Editorial McGraw-Hill Interamericana, 2003, Madrid, Espanha, pp 105-108.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Microbiological Diagnosis. 12 ed. Argentina. Editorial Panamericana SA
- Koneman E, Allen S, Janda W., Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnóstico microbiológico. (5ª ed.). Argentina, Editorial Panamericana SA
- Jawetz E, Melnick J, Adelberg E. (1992). Microbiologia Médica. (Edição 14 ta) México, Editorial El Manual Moderno.
- González M, González N. 2011. Manual of Medical Microbiology. 2ª edição, Venezuela: Direção de mídia e publicações da Universidade de Carabobo.