ANTISTREPTOLISINA O: QUANTIFICAÇÃO, JUSTIFICATIVA, TÉCNICA, PATOLOGIAS - BIOLOGIA - 2025

O O ASO é um anticorpo gerado em resposta a uma infecção causada por Streptococcus pyogenes, também conhecido como Streptococcus beta-hemolítico A. Este grupo produz duas exotoxinas com atividade hemolítica chamadas estreptolisinas "S" e "O".

A estreptolisina S é responsável pela beta hemólise que ocorre no ágar sangue e, embora seja tóxica para certas células do sistema imunológico, não é antigênica. Já a estreptolisina O, por ser lábil ao oxigênio, é responsável pela hemólise que ocorre abaixo do ágar sangue e esta é antigênica.

Streptococcus pyogenes / Diagrama do que acontece no teste ASTO (reação de aglutinação). (Anticorpos ligados a partículas de látex que contêm o antígeno específico). Fonte: Usuário: Graham Beards / Alejandro Porto

Portanto, quando as células do sistema imune interagem com a estreptolisina O, uma resposta imune específica é produzida, a qual gera a ativação dos linfócitos B. Essas células produzem anticorpos direcionados contra a estreptolisina O. Portanto, os anticorpos são chamados antistreptolisina O.

O Streptococcus pyogenes produz diversas patologias, entre as quais se destacam: amigdalite, erisipela, impetigo, febre puerperal, escarlatina e septicemia. Os anticorpos anti-estreptolisina O aparecem 8 a 30 dias após o início da infecção.

A maioria dessas infecções é muito comum na população, por isso é comum que as pessoas tenham anticorpos antiestreptolisina O no sangue. Títulos baixos indicam infecção anterior por essa bactéria, mas títulos altos ou em alta indicam infecção recente ou em andamento.

Quantificação de anticorpos antiestreptolisina O

No laboratório, o título do anticorpo antiestreptolisina "O" pode ser medido por meio de um teste sorológico. O teste de antiestreptolisina O (ASTO) é baseado na reação de aglutinação com látex.

Isso pode ser feito semiquantitativamente, reportando em cruzamentos ou o título também pode ser quantificado. É normal e não significativo encontrar valores até 200 UI / ml ou unidades Todd / ml. Acima desse valor é considerado positivo e clinicamente significativo.

Este teste não exige que o paciente esteja em jejum. O soro é utilizado como amostra, ou seja, o sangue do paciente é coletado e colocado em um tubo sem anticoagulante, sendo centrifugado para a obtenção do soro.

Base da técnica ASTO

A técnica utiliza partículas de látex como suporte para fixar o antígeno da estreptolisina O. As partículas do antígeno absorvidas reagem com o soro do paciente. Se o paciente tiver anticorpos antiestreptolisina O, eles se ligarão ao antígeno anexado à partícula de látex.

Essa ligação causa uma aglutinação que é macroscopicamente visível. A intensidade da reação é diretamente proporcional à concentração de anticorpos presentes.

Técnicas

- Técnica semiquantitativa

A intensidade da reação pode ser semiquantificada em cruzamentos. Para fazer isso, uma placa de reação sorológica é retirada e colocada:

50 µl de soro e 50 µl de reagente ASTO. Misture bem com um palito de madeira e coloque na batedeira por 2 minutos. Observar. Se um rotador automático não estiver disponível, deve ser feito manualmente.

Interpretação

Suspensão sem grumos (uniforme): negativo

1. + = reação fraca

2. ++ = leve reação

3. +++ = reação moderada

4. ++++ = reação forte

Os soros positivos com 3 e 4 cruzamentos podem ser quantificados.

- Técnica quantitativa

Para a quantificação do título, são feitas diluições em série 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

Para isso, proceda da seguinte forma: 4 tubos de ensaio ou tubos Kahn são colocados e 0,5 ml de soro fisiológico são colocados em todos eles. Em seguida, 0,5 ml de soro do paciente é adicionado ao primeiro tubo. Mistura bem. Esse tubo corresponde à diluição 1: 2.

Posteriormente, 0,5 ml é transferido para o tubo 2 e bem misturado. Este tubo corresponde à diluição 1: 4 e assim sucessivamente, até atingir a diluição desejada.

Pegue 50 µl de cada diluição e reaja com 50 µl do reagente ASTO em uma placa de aglutinação, conforme explicado na técnica semiquantitativa.

Interpretação

É considerada a diluição mais elevada em que se observa aglutinação visível. Os cálculos são realizados da seguinte forma:

ASTO = Inverso da maior diluição positiva x sensibilidade da técnica (constante).

Exemplo: Paciente com reação positiva até 1: 8

ASTO = 8 x 200 UI / ml = 1600 UI / ml ou Unidades Todd / ml.

Valor de referência

Adulto normal: até 200 UI / ml

Crianças normais: até 400 UI / ml

recomendações

Recomenda-se que um controle positivo e um negativo sejam montados com os pacientes para garantir que o reagente está em condições ideais. Se o controle positivo não aglutina ou se o controle negativo aglutina, o reagente não pode ser usado.

A reação deve ser interpretada após 2 minutos, após este tempo não é válida se houver aglutinação. Esses são falsos positivos.

Os soros hiperlipêmicos interferem na reação. Eles podem dar falsos positivos.

Um valor ASTO isolado não é muito útil. Deve ser acompanhado pelos sintomas.

Além disso, é aconselhável realizar pelo menos 2 medições de ASTO quando houver suspeita de febre reumática ou glomerulonefrite pós-estreptocócica, a fim de demonstrar o aumento dos níveis de antiestreptolisina O e, assim, confirmar o diagnóstico.

Patologias com altos títulos de antiestreptolisina O

Os anticorpos anti-estreptolisina aumentam após sofrer uma infecção por Streptococcus pyogenes ou Streptococcus do grupo A ß-hemolítico.

Entre eles estão: faringite aguda, escarlatina, impetigo, erisipela, febre puerperal e septicemia.

Alguns pacientes que sofreram de infecções estreptocócicas recentes ou recorrentes podem desenvolver doenças autoimunes como sequela ou complicação da infecção pós-estreptocócica, como glomerulonefrite aguda e febre reumática.

Doenças autoimunes pós-estreptocócicas

Febre reumática

É uma complicação ou sequela inflamatória que pode surgir 1 a 5 semanas após ter uma infecção estreptocócica. Os títulos de antiestreptolisina O aumentam significativamente 4 a 5 semanas após o início da doença.

O alto título de ASTO orienta o diagnóstico, mas não está relacionado à gravidade da doença e sua diminuição não implica em melhora.

Os anticorpos antiestreptolisina O apresentam reação cruzada contra o colágeno e as fibras musculares, afetando determinados órgãos (coração, pele, articulações e sistema nervoso, entre outros).

Esta complicação ou sequela ocorre com envolvimento cardíaco, febre, mal-estar, poliartrite migratória não supurativa, coreia, etc.

Glomerulonefrite aguda

A glomerulonefrite aguda é uma sequela não supurativa que ocorre devido à deposição de complexos antígeno-anticorpo na membrana basal glomerular.

A formação e a circulação de complexos antígeno-anticorpo (ag-ac) gerados por infecções estreptocócicas podem levar a alterações exsudativas e inflamação dos glomérulos, com proteinúria e hematúria.

Esses complexos ag-ac são depositados no glomérulo e ativam a cascata do complemento, resultando em dano endotelial glomerular. Por isso, é considerada uma doença autoimune, uma vez que o sistema imunológico do indivíduo danifica seus próprios tecidos.

Os anticorpos antiestreptolisina O são muito altos e os níveis de complemento são baixos.

Referências

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