LAÇO BACTERIOLÓGICO: CARACTERÍSTICAS, TIPOS, USOS - BIOLOGIA - 2025

A alça bacteriológica é um instrumento de trabalho utilizado por microbiologistas para a semeadura de culturas microbianas (bactérias ou fungos). Talvez seja o instrumento mais utilizado por esses profissionais.

Seu uso parece simples, mas na realidade requer muito treinamento. Antes de iniciar a semeadura, a alça deve ser esterilizada no bico de Bunsen, para então retirar o inóculo microbiano que pode vir de uma cultura líquida ou sólida.

Tipos de loops bacteriológicos. Fonte: Nenhum autor legível por máquina fornecido. ば や お presumido (com base em reivindicações de direitos autorais).

Depois de coletado o inóculo, ele pode ser depositado em meio líquido ou semeado em meio sólido. Após cada procedimento, a alça é esterilizada novamente. O cabo também é adequado para fazer esfregaços microbianos em uma lâmina.

A alça bacteriológica tem muitos nomes, incluindo: alça ou alça de platina, alça de inoculação ou alça de semeadura, porém seu nome real é alça de Kohle.

O material com o qual o cabo é feito geralmente é uma liga de níquel-cromo (nicromo) ou platina. Outra variedade disponível no mercado são as alças bacteriológicas descartáveis ​​de plástico.

Por outro lado, existem vários tipos de loops bacteriológicos, cada um desempenhando uma função dentro das tarefas desempenhadas por um microbiologista. A escolha da alça dependerá do que precisa ser feito.

Por exemplo, para realizar um estriado por esgotamento para isolar um microrganismo, é utilizada a alça de platina, que termina em um anel fechado, independentemente de estar calibrado ou não.

Ao passo que, se for para semear uma amostra de urina, onde é importante quantificar UFC, é necessário usar o loop calibrado. Da mesma forma, para inocular testes bioquímicos, que precisam ser semeados por punção, a alça da agulha é essencial. É importante que o cabo seja manuseado por pessoal treinado.

Caracteristicas

Os loops bacteriológicos são compostos de dois extremos. Uma extremidade corresponde à alça ou base, enquanto a outra é a própria alça.

Alça de base ou alça

A base serve para segurar a alça durante o manuseio. Geralmente é metálico, mas possui um isolante térmico para evitar que o operador se queime ao esterilizar a ponta do cabo no isqueiro. Mede aproximadamente 20 cm, embora possa ser mais longo. Possui rosca para ajustar a alça.

Lidar com

É o fim funcional, ou seja, é a parte que entra em contato com os microrganismos e com os meios de cultura. Consiste em um fio fino que é inserido na base.

O cabo pode ser feito de nicrômio ou platina, por isso é às vezes chamado de cabo de platina. Tem aproximadamente 6,5 cm de comprimento e uma bitola de aproximadamente 0,20 mm. A alça com alça pode medir 26,5 cm. As medidas podem variar de fabricante para fabricante.

Tipos

Existem vários tipos de alças bacteriológicas e cada uma tem um uso específico. Os tipos de cabos são os seguintes: cabo em forma de anel calibrado, cabo em forma de anel não calibrado, cabo reto ou de agulha, cabo espatulado, cabo em forma de “L” e cabo de ponta afiada.

Por outro lado, as alças podem ser permanentes ou descartáveis. Os de uso permanente são esterilizados no isqueiro, sendo reutilizáveis ​​e muito duráveis. Embora os descartáveis ​​sejam esterilizados de fábrica, eles são usados ​​apenas uma vez e são descartados.

Formulários

Alça de anel, não calibrada

É o cabo mais utilizado no laboratório de microbiologia. É utilizado para retirar um inóculo de uma suspensão microbiana (meio líquido) ou de uma porção de colônia (meio sólido), para ser semeado em outro meio de cultura, seja um teste bioquímico ou um meio mais enriquecido ou seletivo, conforme o caso. Também é útil para fazer esfregaços microbianos em uma lâmina.

Com esse tipo de alça, o inóculo inicial pode ser semeado. Ele também é projetado para que deslize suavemente sobre o ágar, sem danificá-lo. Claro, isso requer uma equipe treinada para lidar com a técnica de semeadura, aplicando a força e os movimentos corretos para fazer um bom estriamento.

Várias técnicas de semeadura podem ser executadas com este cabo. Por exemplo, meios sólidos em placas de Petri são geralmente semeados por exaustão (existem várias técnicas, ver vídeo 1).

Essa técnica visa a obtenção de colônias isoladas a fim de estudá-las e identificá-las, principalmente quando a amostra for polimicrobiana, ou seja, a cultura não é pura (contém mais de um tipo de microrganismo).

Em vez disso, as cunhas são plantadas em zigue-zague simples para obtenção de massa bacteriana, não sendo necessário, neste caso, isolar colônias.

Às vezes, eles também são usados ​​para tirar certas amostras. Por exemplo, Rojas e outros usaram a alça bacteriológica para coletar amostras de tecido vaginal raspado de ratos.

Alça bacteriológica com ponta em anel, não calibrada. Fonte: Pixinio.com

Alça em forma de anel, calibrada

Este identificador como o nome indica é calibrado para receber uma quantidade específica de suspensão microbiana. É utilizado quando é necessário que o inóculo atenda ao padronizado no art.

Por exemplo, é muito comum o plantio de culturas de urina. Neste caso, um loop calibrado de 0,01 ml e 0,001 ml pode ser usado.

Deve-se notar que os cabos calibrados possuem uma margem de erro, que varia de acordo com o ângulo com que a amostra é retirada e o tamanho da boca do recipiente.

Se a alça de 0,001 ml for inserida verticalmente em um recipiente com boca pequena (≤ 7 mm), a quantidade retirada será 50% menor do que o desejado.

Isso ocorre porque quanto menor o diâmetro da boca do recipiente, maior a tensão superficial e, portanto, as forças de adesão entre (vidro - líquido) aumentam. Isso faz com que a carga de líquido recebida pela alça seja menor.

Ao passo que, se for tomado em um ângulo de 45 ° em um recipiente com uma boca larga (≥ 22 mm), 150% a mais do que a quantidade necessária pode ser coletada. Nesse caso, a tensão superficial é menor e as forças de coesão vidro / plástico diminuem, enquanto a força de coesão líquido-líquido aumenta.

Por causa do acima, outros métodos para a quantificação de unidades formadoras de colônia são às vezes preferidos para culturas de urina.

Cabo reto ou agulha

Também é chamado de identificador de thread. É utilizado para inocular determinados testes bioquímicos, principalmente aqueles que precisam ser semeados pela técnica de punção. Por exemplo, meios semissólidos que são preparados na forma de um bloco, tais como: meio SIM, MIO e meio O / F.

Além disso, no caso de MIO e SIM que avaliam a motilidade, é imprescindível que a punção seja realizada com alça de agulha, pois a interpretação de uma motilidade positiva ocorre quando a bactéria cresce em direção às laterais do inóculo inicial.

Um teste inoculado com um loop loop pode falsificar os resultados (falso positivo). Por isso, neste tipo de semeadura, deve-se ter cuidado para que a punção seja única e, ao ser retirada, saia na mesma direção em que entrou.

Outro teste que deve ser semeado com agulha, embora seja preparado em forma de cunha, é o Kligler. Neste teste, não é recomendado que o oxigênio penetre profundamente no ágar, pois um meio pobre em oxigênio é necessário para que certas reações químicas ocorram. Esta alça também é usada para tocar uma colônia específica para fins de subcultura.

Pega espatulada

A maioria dos microrganismos dá colônias moles e fáceis de eliminar. No entanto, existem alguns agentes microbianos cujas colônias são duras e secas, por exemplo, micobactérias em geral e alguns fungos. Nestes casos, é útil usar o cabo espatulado.

Cabo em forma de "L"

Seu uso mais frequente é para chimar culturas de fungos, especialmente bolores.

Cabo de ponta afiada

É útil para retirar colônias muito pequenas presentes em culturas polimicrobianas, a fim de poder subcultivá-las.

Técnicas de semeadura

Vídeo 1

Esterilização do cabo de platina

O cabo deve ser esterilizado antes e depois do uso. Para esterilizar a alça bacteriológica do isqueiro, proceda da seguinte forma: o cabo deve ser colocado no topo da chama, adotando a posição o mais vertical possível, de forma a esterilizar da ponta para cima.

Quando o filamento fino fica vermelho brilhante, pode-se dizer que é estéril. Para utilizá-lo, ele é resfriado e a amostra escolhida é retirada. (Veja o vídeo 2).

Esterilização da alça bacteriológica

Vídeo 2

Referências

1. "Laço bacteriológico" Wikipedia, The Free Encyclopedia. 23 de julho de 2019, 13:31 UTC. 18 de agosto de 2019, 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Cabos metálicos calibrados para microbiologistas: Uma alternativa de fabricação nacional. Soc. Come. Microbiol. 2010; 30 (1): 37-42. Disponível em: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Microbiological Diagnosis. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W., Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnóstico microbiológico. 5ª ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, et al. Determinação do efeito analgésico do extrato de hexano das flores de Eupatorium arsenei em um modelo de dor aguda em ratos. mex. Ciência. Fazenda. 2015; 46 (1): 64-69. Disponível em: scielo.org