CALMODULINA: ESTRUTURA, FUNÇÕES E MECANISMO DE AÇÃO - BIOLOGIA - 2025

Calmodulina é um termo que passa a significar "proteína modulada por cálcio", e se refere a uma pequena proteína intracelular que tem a propriedade de se ligar ao íon cálcio (Ca ++) e mediar muitas de suas ações intracelulares. A origem da palavra vem da combinação das palavras inglesas 'cálcio', 'modulado' e 'proteína' que, quando colocadas juntas, derivam em CAL cium MODUL ated prote IN.

Entre os elementos minerais que passam a fazer parte da constituição dos organismos animais, o cálcio, seguido do fósforo, é de longe o mais abundante, pois o osso é formado pela deposição em sua matriz de grandes quantidades de sais minerais. formado a partir deste íon.

Esquema da calmodulina e seus locais de ligação de cálcio (Fonte: PDB via Wikimedia Commons)

Claro, esses sais minerais de cálcio são essenciais para a constituição e conformação do sistema esquelético dos vertebrados, mas é a forma ionizada do cálcio (Ca ++) em solução nos fluidos corporais que adquire uma importância fisiológica relevante para a vida dos animais. organismos.

Este cátion, com duas cargas elétricas positivas em excesso em sua estrutura, pode atuar como um transportador de corrente movendo-se através da membrana celular e modificando seu nível de potencial elétrico em muitas das células excitáveis ​​do corpo, principalmente no músculo cardíaco.

Mas de maior relevância fisiológica é o fato de que muitas reações regulatórias celulares desencadeadas por estímulos externos, como neurotransmissores, hormônios ou outros fatores físicos ou bioquímicos, são espécies de cascatas metabólicas nas quais várias proteínas participam sequencialmente, algumas das quais são enzimas que requerem cálcio para sua ativação ou inativação.

Diz-se então, nesses casos, que o cálcio atua como um segundo mensageiro em uma cascata metabólica destinada a ter um resultado final que seria como a resposta celular necessária para satisfazer uma necessidade detectada em um nível diferente do da própria célula, e que requer dela aquela resposta particular.

O cálcio pode atuar diretamente em seu alvo bioquímico para influenciar sua atividade, mas muitas vezes requer a participação de uma proteína com a qual deve se ligar para exercer seu efeito na (s) proteína (s) a ser modificada. A calmodulina é uma dessas proteínas mediadoras.

Estrutura

A calmodulina, altamente ubíqua, por se expressar em quase todos os tipos de células de organismos eucarióticos, é uma pequena proteína ácida com peso molecular de cerca de 17 kDa, cuja estrutura é altamente conservada entre as espécies.

É uma proteína monomérica, ou seja, formada por uma única cadeia polipeptídica, que em suas extremidades assume a forma de domínios globulares unidos por uma hélice alfa. Cada domínio globular tem dois motivos conhecidos como mão EF (mão EF) que são típicos para proteínas de ligação de cálcio.

Calmodulina ligada a quatro íons de cálcio (Fonte: Webridge via Wikimedia Commons)

Esses motivos topológicos em "mão EF" representam um tipo de estruturas supersecundárias; Estão ligados entre si, em cada domínio globular, por uma região de grande flexibilidade e em cada um deles existe um sítio de ligação para o Ca ++, que dá origem a 4 sítios no total para cada molécula de calmodulina.

A ligação de íons de cálcio carregados positivamente é possível pela presença de resíduos de aminoácidos com cadeias laterais carregadas negativamente nos locais de ligação de cálcio da calmodulina. Esses resíduos são três aspartatos e um glutamato.

Funções da calmodulina

Todas as funções conhecidas até agora para a calmodulina enquadram-se em um grupo de ações promovidas pelos aumentos do cálcio citosólico produzidos por sua entrada no espaço extracelular ou sua saída dos depósitos intracelulares: mitocôndrias e retículo endoplasmático.

Muitas das ações do cálcio são realizadas por esse íon agindo diretamente sobre suas proteínas-alvo, que podem ser de diferentes tipos e funções. Algumas dessas proteínas não podem ser influenciadas diretamente, mas requerem cálcio para se ligar à calmodulina e é esse complexo que atua sobre a proteína influenciada pelo íon.

Diz-se que estas proteínas alvo são dependentes de cálcio-calmodulina e incluem dezenas de enzimas, tais como proteínas quinases, proteínas fosfatases, nucleótidos ciclases e fosfodiesterases; todos eles envolvidos em uma miríade de funções fisiológicas que incluem:

- O metabolismo

- O transporte de partículas

- Mobilidade visceral

- A secreção de substâncias

- Fertilização dos óvulos

- Expressão genética

- Proliferação celular

- A integridade estrutural das células

- Comunicação intercelular, etc.

Entre as proteínas quinases dependentes de calmodulina, são mencionadas as seguintes: cadeia leve quinase de miosina (MLCK), fosforilase quinase e Ca ++ / calmodulina quinases I, II e III.

Assim, a informação codificada pelos sinais de cálcio (aumento ou diminuição de sua concentração intracelular) é “decodificada” por esta e outras proteínas ligantes de cálcio, que convertem os sinais em alterações bioquímicas; em outras palavras, a calmodulina é uma proteína intermediária nos processos de sinalização dependentes de cálcio.

Mecanismo de ação

A calmodulina é uma proteína muito versátil, pois suas proteínas "alvo" são consideravelmente diversas em forma, sequência, tamanho e função. Por se tratar de uma proteína que funciona como um "sensor" de íons cálcio, seu mecanismo de ação depende das mudanças induzidas em sua estrutura e / ou conformação ao se ligar a quatro desses íons.

Seus mecanismos de ação podem ser exemplificados por uma breve revisão de sua participação em alguns processos fisiológicos, como a contração do músculo liso visceral e a adaptação aos odores sofridos pelas células ciliadas da mucosa olfatória do nariz.

Calmodulina e contração do músculo liso

Estrutura das pontes cruzadas de miosina 1A e calmodulina nos feixes de actina de microvilosidades. Fonte: Jeffrey W. Brown, C. James McKnight

A contração dos músculos esquelético e cardíaco é desencadeada quando o aumento do Ca ++ citosólico atinge níveis acima de 10-6 mol / le esse íon se liga à troponina C, que sofre alterações alostéricas que afetam a tropomiosina. Por sua vez, a tropomiosina se move, expondo seus locais de ligação à miosina na actina, causando o disparo do processo contrátil.

A troponina C não existe no músculo liso e o aumento do Ca ++ acima do indicado promove sua ligação com a calmodulina. O complexo Ca-calmodulina ativa a cadeia leve quinase da miosina (MLCK), que por sua vez fosforila essa cadeia leve, ativa a miosina e desencadeia o processo contrátil.

O aumento do Ca ++ ocorre por sua entrada externa ou sua saída do retículo sarcoplasmático pela ação do trifosfato de inositol (IP3) liberado pela fosfolipase C na cascata ativada por receptores acoplados à proteína Gq. O relaxamento ocorre quando o Ca ++, por ação de transportadores, é removido do citosol e retorna aos seus locais de origem.

Uma diferença importante entre os dois tipos de contração é que nos músculos estriados (cardíacos e esqueléticos) o Ca ++ induz alterações alostéricas ligando-se à sua proteína, a troponina, enquanto nos músculos lisos as alterações produzidas pela Ca-calmodulina são covalentes e envolvem fosforilação da miosina.

Portanto, encerrada a ação do Ca ++, é necessária a participação de outra enzima para a remoção do fosfato adicionado pela quinase. Essa nova enzima é a fosfatase de cadeia leve da miosina (MLCP), cuja atividade não depende da calmodulina, mas é regulada por outras vias.

Na realidade, o processo contrátil do músculo liso não cessa completamente, mas o grau de contração permanece em um nível intermediário como resultado do equilíbrio das ações de ambas as enzimas, o MLCK controlado por Ca ++ e calmodulina, e o MLCP submetido a outros controles regulatórios.

Adaptação em sensores olfativos

A sensação odorífera é desencadeada quando os receptores olfatórios localizados nos cílios das células localizadas na superfície da mucosa olfatória são ativados.

Esses receptores são acoplados a uma proteína G heterotrimérica conhecida como "Golf" (proteína G olfativa), que possui três subunidades: "αolf", "ß" e "γ".

Quando os receptores olfatórios são ativados em resposta a um odor, as subunidades dessa proteína se dissociam e a subunidade "αolf" ativa a enzima adenil ciclase, produzindo adenosina monofosfato cíclico (cAMP).

O cAMP ativa canais do tipo CNG (ativados por nucleotídeos cíclicos) para cálcio e sódio. Esses íons entram na célula, despolarizam-na e provocam o início de potenciais de ação cuja freqüência determinará a intensidade do odor.

O cálcio que entra, que tende a despolarizar a célula, tem um efeito antagônico de feedback negativo, um pouco mais tarde, ao se ligar à calmodulina e entre fechar o canal e eliminar o estímulo despolarizante, mesmo que o estímulo odorífero persista. Isso é chamado de correspondência de sensor.

Calmodulina em plantas

As plantas também respondem a diferenças na concentração intracelular de íons de cálcio por meio da proteína calmodulina. Nestes organismos, as calmodulinas compartilham muitas características estruturais e funcionais com suas contrapartes animais e de levedura, embora diferem em alguns aspectos funcionais.

Por exemplo, a calmodulina em plantas se liga a sequências peptídicas curtas dentro de suas proteínas-alvo, induzindo mudanças estruturais que alteram suas atividades em resposta a variações internas no cálcio.

Até que ponto a calmodulina controla processos análogos aos que ocorrem em animais em plantas ainda é uma questão de discussão hoje.

Referências

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