- Fundação e materiais
- materiais
- Passos
- Exame macroscópico e microscópico
- Técnica original de Faust
- Técnica de Faust por centrifugação
- Vantagem
- Desvantagens
- Referências
A técnica de Faust é uma metodologia que permite a concentração de alguns ovos e / ou larvas de parasitas contidos nas fezes por flutuação. É utilizado quando os testes coproparasitológicos diretos são negativos ou quando se deseja obter amostras limpas e isentas de detritos.
Os métodos de concentração para exames coproparasitológicos são de três tipos: por flotação, por sedimentação ou por métodos que combinam os dois anteriores. Esses métodos aumentam as chances de resultados positivos.
Análise de fezes.
O método Faust consiste em misturar parte da amostra de fezes com uma substância mais densa que os ovos ou parasitas a serem concentrados. Isso faz com que, por serem menos densos, eles flutuem na superfície. O fluido sobrenadante é coletado e visualizado ao microscópio para identificação e quantificação.
Este método é usado para visualizar ovos de helmintos. Ao mesmo tempo, tem se mostrado um método muito sensível para o diagnóstico de Giardia lamblia, um protozoário flagelado amplamente difundido em todo o mundo. Os métodos de flotação não são recomendados para ovos de parasitas muito pesados, como tênias e trematódeos.
Parasitas são uma das infecções intestinais mais comuns em todo o mundo, especialmente em países pobres com medidas sanitárias precárias. Por isso, ter métodos sensíveis para identificar e quantificar esses parasitas é muito útil para o diagnóstico e tratamento.
Fundação e materiais
A técnica baseia-se na existência de diferentes gravidades específicas de ovos, parasitas, cistos, larvas e detritos, utilizando soluções de sulfato de zinco como método de flotação.
A lógica por trás da técnica é misturar a amostra com uma solução de sulfato de zinco que tenha uma densidade maior do que a de ovos mais leves, larvas ou parasitas.
Isso permite que os elementos mais pesados precipitem e os mais leves flutuem, que aparecem no sobrenadante após a centrifugação das amostras.
materiais
Recipientes para coleta de amostras fecais (Fonte: Bobjgalindo via Wikimedia Commons)
- Prepare uma solução de sulfato de zinco com densidade de 1,18 ou 1,2 g / ml se a amostra foi tratada anteriormente.
- Prepare um rack com tubos de ensaio previamente rotulados.
- Tenha uma máquina centrífuga.
- Tenha lâminas de microscópio e lamínulas à mão. Todos devem ser rotulados
- Certifique-se de que existe uma solução de Lugol para tingir as folhas.
- Tenha gaze para filtrar.
- Tenha funis e água destilada.
- Localize recipientes de plástico ou papelão rotulados.
- Também aplicadores e cabo estéril de 5 mm.
- Um isqueiro para esterilizar o cabo.
Passos
Exame macroscópico e microscópico
Para qualquer exame de fezes, o exame começa com o que é chamado de "exame macroscópico" das amostras.
A consistência, a cor, a presença do que parece ser sangue, a presença de muco e a presença de parasitas adultos são descritos.
Aí passamos para o “exame microscópico” das fezes, isso depende do método. O mais simples é o método de esfregaço direto, que é o método mais simples de observação microscópica de parasitas.
Fotografia da observação de Gardia lamblia, um parasita intestinal (Fonte: Riddlemaster via Wikimedia Commons)
O procedimento envolve a colocação de uma pequena quantidade da amostra diretamente em uma lâmina. Coloque várias gotas de solução salina que devem ser de tamanho semelhante ao da amostra. Misture a solução salina com as fezes até formar uma mistura homogênea. Coloque uma lamela e examine ao microscópio.
Técnica original de Faust
O segundo procedimento consiste no método float Faust, cuja versão original consiste em:
1- Coloque cerca de dois gramas de fezes em um recipiente adequado para esse fim.
2- Adicionar 30 ml de solução de flotação de sulfato de zinco com a qual é feita a emulsão misturando a solução com as fezes.
3- Coe com uma peneira de metal em um segundo recipiente e transfira para um tubo de ensaio.
4- Adicione mais solução de flotação até que se forme um menisco no tubo.
5- Coloque uma lamela de vidro no menisco. Deixe descansar por 10 a 15 minutos.
6- Retire a lamínula e coloque-a sobre uma lâmina, que será examinada ao microscópio.
Técnica de Faust por centrifugação
Originalmente, o método não usava centrifugação, mas agora está incluído à medida que melhores resultados são obtidos. A técnica envolve uma série de etapas para alcançar um procedimento adequado, a saber:
1- As fezes são lavadas com água, bem misturadas e depois filtradas com gaze dobrada em quatro. A amostra é colocada em um tubo de ensaio.
2- Centrifugue e remova o sobrenadante (amostras que são mantidas acima da água). Os passos 1 e 2 são repetidos até que o sobrenadante esteja "claro".
3 - O sulfato de zinco é adicionado à amostra filtrada e centrifugada.
4- Mistura bem.
5- Centrifugue novamente por 1 minuto a 2500 rpm (rotações por minuto).
6- O sobrenadante é recuperado com uma alça estéril de cerca de 5mm; os tubos não devem ser agitados.
7- A amostra recuperada do sobrenadante é colocada em uma lâmina e uma gota de Lugol pode ser colocada para colorir, a lamínula é colocada e observada ao microscópio.
8- Os recipientes e tubos de ensaio estão etiquetados.
Vantagem
- Os elementos utilizados para o diagnóstico podem ser vistos limpos e sem “detritos”, o que facilita a observação do lençol e diminui o tempo gasto para o diagnóstico.
- No sobrenadante, tanto larvas, ovos e / ou cistos são recuperados.
- É um método de baixíssimo custo.
- O procedimento é muito simples e fácil de implementar.
- O diagnóstico é rápido e preciso.
- Devido à importância e alta incidência de parasitoses em países pobres, esses métodos de baixo custo e fáceis de usar são ideais para o diagnóstico e monitoramento dessas patologias.
Desvantagens
A densidade da solução de flotação produz uma contração das larvas, ou seja, elas encolhem e, em um período muito curto, podem se deformar. Isso força o examinador a fazer o diagnóstico imediatamente e as amostras tratadas não podem ser guardadas para exames futuros.
Como acontece com todos os métodos de identificação microscópica, uma equipe de exames altamente experiente é necessária para fazer diagnósticos precisos.
A rápida deformação dos elementos necessários ao diagnóstico, embora sejam uma desvantagem óbvia, pode ser corrigida por meio de observações microscópicas imediatas.
Referências
- Ananias, FL (2017). Avaliação da sensibilidade do método Faust e sedimentação espontânea para o diagnóstico de giardíase. Jornal Cubano de Medicina Tropical, 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Avaliação comparativa de uma técnica modificada de flotação com sulfato de zinco. Journal of Clinic microbiology, 7 (6), 524-528.
- Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Sensibilidade e eficiência de métodos coproscópicos selecionados - sedimentação, sedimentação-flotação combinada com sulfato de zinco e método de McMaster. Parasitology research, 115 (7), 2581-2587.
- Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW,… & Visvesvara, G. (2018). Diagnóstico laboratorial de parasitas do trato gastrointestinal. Revisões de microbiologia clínica, 31 (1), e00025-17.
- Summers, WA (1942). Uma modificação do método de flotação centrífuga de sulfato de zinco para recuperação de ovos de helmintos em fezes formalizadas. Journal of Parasitology, 28 (4), 345-346.